技术简介

DNA methylation（DNA甲基化）是指在甲基化转移酶的作用下，DNA的CG双核苷酸的胞嘧啶被选择性的添加甲基，形成5-甲基胞嘧啶，哺乳动物细胞中甲基化主要发生在CG双核苷酸的胞嘧啶上，植物细胞中则存在很大比例的non-CG（CHH、CHG，H代表A、C、T）甲基化。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。异常的DNA甲基化会导致发育异常、肿瘤等疾病的发生。因此，DNA甲基化的研究对于深入理解基因表达、个体发育以及疾病的发生、发展机制都具有重要意义。

重亚硫酸盐（Bisulfite）处理能够将未甲基化修饰的C碱基将被转化为U，而甲基化修饰C碱基将保持不变，因此成为表观遗传学研究的经典实验方法。WGBS（Whole Genome Bisulfite Sequencing，全基因组甲基化测序）将Bisulfite处理与高通量测序技术相结合，能够绘制单碱基分辨率的DNA甲基化图谱，可用于研究物种特定DNA区域甲基化与特定表型之间的关联。

WGBS实验原理

人们开发了多种方法来测定样本中的DNA甲基化水平。全基因组重亚硫酸氢盐测序WGBS（Whole Genome Bisulfite Sequencing）被视为是检测甲基化水平的“金标准”，其原理是用亚硫酸氢钠（Sodium Bisulfite）处理，将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U，经过PCR扩增后变成T，与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来，再结合高通量测序，与参考序列比对，即可判断CpG/CHG/CHH（H为A或C或T）位点是否发生甲基化。

技术流程及路线

技术应用

技术优势